Técnicas de aislamiento y caracterización química de extractos bioactivos y moléculas de interés terapéutico
Cromatografía en columna, capa fina, de gases.
Espectrometría de masa.
Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).
Estrés oxidativo y actividad antioxidante
Determinación de actividades enzimáticas (mieloperoxidasa, glutation peroxidasa y reductasa, xantina-oxidasa, superóxido dismutasa) y scavengers (glutatión) en fluidos biológicos.
Medidas de peroxidación lipídica.
Ensayo espectrofotométrico del DPPH.
Medida de la producción intracelular de especies reactivas de oxígeno.
Determinación de nitritos y nitratos.
Estudios sobre envejecimiento: Determinación de actividad sirtuinas. Enzimoinmunoensayo (ELISA)
Determinación de citocinas Th1 y Th2: IL-1b, Interferon γ, TNF-a, IL-8, IL-10, Il-2, IL-17 etc.
Determinación de prostanoides: prostaglandinas PGE2 y PGD2.
Estudios de expresión de proteínas citoplasmáticas y nucleares por Western blot
COX-2, mPGH2, iNOS, HIF-1, IKappa, p65, p-p38 cinasa, p-Jun NH2 –terminal cinasa, p-ERK, p53, PPARγ, Nrf2, HO-1, STAT, FoxP3, etc.
Estudios de expresión génica por PCR a tiempo real. Ensayos de viabilidad celular y proliferación
Ensayo de citotoxicidad por sulforodamina (SRB).
Ensayo de proliferación por Bromuro de 3-(4,5- dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol (MTT).
Citometría de flujo
Ensayos de apoptosis por marcaje con Anexina V.
Estudio del ciclo celular.
Estudios histopatológicos de tejidos mediante microscopia óptica
Análisis de imágenes: tinción hematoxilina/eosina, azul trypan, azul alcian, etc.
Inmunohistoquímica: Valoración de la expresión de proteínas como COX-2, iNOS, β-catenina, PCNA, etc.
